Manfred von Holtum wurde am 20. Juni 1944 in Krefeld-Traar geboren. Nach seinem Abitur am Städtischen Arndt-Gymnasium in Krefeld studierte er Philosophie und Theologie in Bonn und München. Am 4. Juli 1970 wurde er in Aachen zum Priester geweiht. Nach Kaplansjahren an St. Andreas in Setterich war er seit August 1972 als hauptamtlicher Religionslehrer am Gymnasium Thomaeum in Kempen am Niederrhein tätig. Von 1978 bis 1984 war er Dechant des Dekanates Kempen-Tönisvorst und von 1980 bis 1990 Pfarrer an St. Josef in Kempen-Kamperlings. Im Dezember 1983 wurde er Regionaldekan der Bistumsregion Kempen-Viersen, ein Amt, das er bis November 1993 wahrnahm. Von März 1990 bis Oktober 1993 wirkte er als Pfarrer an St. Remigius in Viersen. Anschließend war er bis zum 30. September 1997 Direktor des Caritasverbandes für das Bistum Aachen. Vom 1. Oktober 1997 bis 8. Januar 2015 übernahm Manfred von Holtum das Amt des Generalvikars des Bistums Aachen.
Im Juli 2003 ernannte ihn Bischof Dr. Heinrich Mussinghoff zum residierenden Domkapitular und am 7. Dezember 2014 zum Dompropst am Hohen Dom zu Aachen.